有關competentcell?? - 藥品

By Tristan Cohan
at 2008-03-12T00:00

Table of Contents

請問competent cell DH5 alpha, BL21和Rosetta
之間有何不同?
各具哪些優點?
謝謝

All Comments

By Odelette
at 2008-03-14T19:59

這三種菌株的不同處在於他們本身所攜帶的基因
DH5α
--> 可以抵抗 nalidixic acid
(因為nalidixic acid會抑制DNA gyrase的活性，進而干擾DNA的複製與修復)
-->使用pUC系列plasmid進行轉形，因為質體產生的LacZa和DH5α編碼的lacZDM15相結合，進而顯示b-半乳糖苷酶活性 (a-互補性)。
所以可以用藍白篩選來輕鬆找到重組成功的菌株
BL21
-->帶有λ prophage ( the T7 RNA polymerase gene and lacIq )
轉入的plasmid如果帶有 T7 promoter 就可以用IPTG去作用在 lac promoter來誘發 T7 RNA polymerase，進而使質體上的T7 promoter啟動來轉錄轉譯目標基因
Rosetta
-->BL21的衍生菌一樣帶有λ prophage ( the T7 RNA polymerase gene and lacIq ) 所以與上述BL21同
-->可以抵抗Chloramphenicol(抗生素)
-->含有 pRARE2 ，可以補充7種大腸桿菌缺乏的密碼子 AUA，AGA，AGG，CUA，CCC，GGA，CGG所對應的tRNA 以提高外來基因的表現，特別是真核生物的基因。
OK!以上這是他們各自的特點
基本上
你可以發現DH5α比較適合用來保存以及放大質體
而不太適合表達重組基因
至於BL21和Rosetta則是適合用來表達重組基因
我本身有用過DH5α及BL21
我發現DH5α比BL21容易transformation
而且BL21不能用來長期保存質體
當我把重組質體transform入BL21後再做菌株保存
等到將它解凍後
表達出來的蛋白質全毀了
BL21中的重組質體也不易抽出!

By Emma
at 2008-03-14T00:19

很詳細~非常感謝你

有關competentcell?? - 藥品

All Comments

Related Posts

斗六綠柚子月子餐

解釋名詞&藥動學計算

我的過敏性鼻炎能根治嗎?

孕婦產後飲食料理食譜

生完才會分泌乳汁嗎?