今天我拿到一個嗜熱菌!!
我知道它有酯解酵素功能!!
因為這是一個新的菌種，還沒被定序過!!全部都是未知的序列!!
我該用什麼方法來去篩選出我要的酵素基因片段??
那我又如何知道我篩選出來的就是我要的基因序列??
可以請高手指導一下嘛!!
Update:
我知道可以用限制沒切割!!
可是我根本不知道我菌的基因序列!!
用哪種限制酶下去切都不知道呢???
我知道它有酯解酵素功能!!
因為這是一個新的菌種，還沒被定序過!!全部都是未知的序列!!
我該用什麼方法來去篩選出我要的酵素基因片段??
那我又如何知道我篩選出來的就是我要的基因序列??
可以請高手指導一下嘛!!
Update:
我知道可以用限制沒切割!!
可是我根本不知道我菌的基因序列!!
用哪種限制酶下去切都不知道呢???
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1.把你拿到的這個嗜熱菌的DNA先用切割酶切成片段
2.把片段粘合到載體上(人造的質體，當然此質體是已經定序和附加許多功能的質體)，此時有很多個不同片段粘合出來的質體
3.細菌吸入後培養(轉型作用)
4.藉由抗生素、特殊養分等條件(擁有人造質體的細菌才會存活)只剩下吸入各個片斷粘合質體的細菌
5.找出擁有酯解酶的菌落把他拿去用PCR擴大之後定序，就OK了
這裡有基因選質的過程:
http://www.e-biolearning.com/bbs/context.asp?id=71...